维生素B₁₂标准储备液 (1 mg/mL) ：准确称取维生素B₁₂标准物质10 mg（精确至0.00001 g）于10 mL棕色容量瓶，用乙醇溶解并定容至刻度线，摇匀转移至棕色试剂瓶，于-20 ℃下避光保存。有效期6个月。

维生素B₁₂中间液 (1000 ng/mL) ：移取维生素B₁₂标准储备液0.05 mL于50 mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度线。有效期1周。

维生素B₁₂标准工作液：分别移取适量维生素B₁₂中间液用水逐级稀释成质量浓度为10 ng/mL，20 ng/mL，50 ng/nL，100 ng/mL，300 ng/nL，500 ng/mL的标准工作液，现用现配。

图2、维生素B₁₂标准品、液体饮料样品、液体饮料样品加标

（加标量：0.17μg/100g）对比图

1. 维生素B₁₂

图3、维生素B₁₂标准品、固体饮料样品、固体饮料样品加标

（加标量：0.17μg/100g）对比图

1. 维生素B₁₂

由实验谱图和加标回收率结果可以看出，饮料样品中目标待测物可有效分离，并获得优异的回收率；VB₁₂在10 ng/mL~500 ng/mL的范围内线性良好，纳谱分析的SelectCore VB12免疫亲和柱可有效去除饮料中基质干扰，结合ChromCore T3色谱柱，能够准确测定饮料中VB₁₂含量，满足标准方法的定量要求。

1）SelectCore VB12免疫亲和柱放置在4 °C冰箱中冷藏保存，不可冷冻；使用前，需提前取出，使之恢复到室温（22-25 °C）。

2）实验全程需避光操作处理。

3）上样液pH要在5~7之间，超过范围会出现目标物流穿或目标物降解等情况。

4）固相萃取过程中，样品过柱、淋洗、洗脱时，一定要控制好流速，流速太快，会使检测结果偏低。