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【应用分享】抗体偶联小核酸 (AOC) DAR值测定

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抗体偶联小核酸示意图

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抗体偶联小核酸 (Antibody‑Oligonucleotide Conjugates, AOC) 与ADC类似，是抗体 (靶向递送系统) +连接子 (Linker, 化学“桥梁”) +寡核苷酸 (药效部分，小核酸) 的共价偶联物，将治疗性寡核苷酸 (如siRNA、ASO、PMO) 通过连接子偶联到抗体上，实现基因药物的靶向递送，突破现有小核酸药物仅能靶向肝脏的局限，其结合了抗体的靶向能力与寡核苷酸的基因调控能力，正在改变肌肉病、肿瘤、中枢神经系统疾病等多种难治性疾病的治疗格局。

尽管AOCs尚处于发展早期，全球尚无一款AOC上市，但在过去几十年中进展稳步，目前正处于从临床前向临床转化、从罕见病向常见病拓展的快速发展期，部分核心药物已接近上市，是目前医药领域较前沿的创新技术之一。目前国内越来越多的生物药企开始布局AOC，涵盖头部药企、初创企业、Biotech及传统大药企。


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检测方法

AOC的寡核苷酸链带有大量磷酸基团，使分子整体携带强负电荷；且随着偶联药物个数不同，分子间电荷差异显著。因此，阴离子交换色谱（AEX-HPLC）成为AOC DAR值分析的常用方法。

本次采用BioCore WAX 10μm, 4.6×150mm色谱柱弱阴离子交换柱，建立的AOC DAR值测定实例，为AOC工艺开发、质量控制与放行检测提供实用参考方案。

AOC DAR值测定

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2

实验结论


由以上实验可知，使用纳谱分析的BioCore WAX 10μm, 4.6×150mm色谱柱测试AOC DAR值样品, 在含10%乙腈的20 mM Tris, pH8.5体系下, 不同DAR值的AOC、AOC和游离siRNA以及mAb均获得良好的分离效果。该色谱柱可以为抗体偶联小核酸 (AOC) DAR值测定提供监测依据。


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