取桔青霉素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含12.5 ng的溶液，作为贮备溶液。取贮备溶液适量，用甲醇-0.1%磷酸溶液（70∶30）制成每1 mL含0.25 ng、0.625 ng、1.25 ng、2.5 ng、3.75 ng的溶液，即得。

取本品粉末约1 g，精密称定，置50 mL离心管中，精密加入70%甲醇20 mL，匀浆处理（转速不低于15000 转/分钟）2分钟，离心（转速为4000 转/分钟）5分钟，精密吸取上清液0.5 mL，置20 mL量瓶中，加PBS缓冲液稀释至刻度，摇匀，以玻璃纤维滤纸滤过，即得。

SelectCore CTN免疫亲和柱 3 mL；

活化：取出免疫亲和柱，恢复至室温（22-25 °C），放干免疫亲和柱的保护液；

上样：精密量取步骤3中制备好的续滤液10 mL，通过免疫亲和柱，流速为每分钟3 mL，弃去流出液；

淋洗：用0.1%聚山梨酯20 PBS淋洗液10 mL淋洗，弃去淋洗液，使空气进入柱子，将淋洗液挤出柱子；

洗脱：精密加入甲醇-0.1%磷酸溶液（70∶30）1 mL，收集全部洗脱液，混匀，即得。

由实验谱图和加标回收率结果可以看出，纳谱分析的SelectCore CTN免疫亲和柱可以有效去除红曲中基质干扰，搭配使用ChromCore T3色谱柱可以高效分离干扰物质与桔青霉素，并且回收率均在90%以上，能够准确检测目标物含量，满足2025版中国药典对于

桔青霉素的测定要求。