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疏水作用色谱(Hydrophobic Interaction Chromatography,HIC)是根据分子表面疏水性差异来分离蛋白等生物大分子的常用方法,是一种非变性分离模式。HIC模式下,高盐浓度将待分离的样品吸附在固定相上,然后线性或阶段降低流动相中盐浓度,有选择性地洗脱样品。分离过程中,随着流动相中盐浓度的降低,疏水性弱的蛋白先被洗脱下来,疏水性强的蛋白随后被洗脱下来。
影响HIC的因素,主要包括以下几个方面:
○ 疏水官能团类型和密度
○ 固定相基质
○ 流动相中盐种类和浓度
○ 样品疏水性
疏水作用色谱常用于抗体偶联药物 (ADC) 的毒素/抗体比值 (DAR) 测定;对于双抗、融合蛋白等会出现错配或氧化变异体的生物大分子,可以利用疏水作用模式进行分离。
2021年以来,纳谱分析陆续推出BioCore HIC-Butyl和HIC-Phenyl疏水作用色谱柱等产品。今日,纳谱分析正式推出第3款疏水作用色谱柱——BioCore HIC-OH色谱柱。
BioCore HIC-OH色谱柱是基于单分散大孔硅胶微球,采用先进的表面键合与修饰技术,经优化装填工艺而成的高性能疏水作用色谱柱,适用于双抗和融合蛋白等不同疏水性组分的分离,广泛应用于生物技术、生物制药和科研等领域。
对双抗和融合蛋白等具有良好的保留和分离选择性
单分散微球技术,柱效高
独特的表面修饰工艺,非特异性吸附低
良好柱间一致性
表格1. 不同批次不同组分保留时间情况
使用多肽样品,对三个不同批次BioCore HIC-OH色谱柱进行测试评估,不同组分保留时间RSD<2%,表明良好的柱间一致性。
BioCore HIC-OH色谱柱可以有效实现双抗样品不同组分的良好分离。
BioCore HIC-OH色谱柱同样可以实现融合蛋白疏水性杂质与主成分的良好分离。
由以上测试对比可知,BioCore HIC-OH色谱柱在双抗、融合蛋白等不同疏水性组分分离中表现出良好的分离选择性,柱间一致性良好。
目前,BioCore HIC系列可提供3款固定相色谱柱,另外两款色谱柱分别是:
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* 纳谱分析除以上常规分析柱,还可提供相应制备柱,具体产品,请咨询我司当地销售人员或拨打400 808 3822服务热线。
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