一、适用范围

氢氧化钾溶液（500 g/L）：称取500 g氢氧化钾，加水溶解，冷却后用水定容至1 L，混匀。

70%乙醇溶液：量取无水乙醇70 mL，用水稀释，定容至100 mL，混匀。

10%甲醇溶液：量取甲醇10 mL，用水稀释，定容至100 mL，混匀。

0.1%甲酸溶液：量取甲酸1 mL，用水稀释，定容至1 L，混匀。

将皂化液全部转移至100 mL棕色容量瓶中，用5 mL 70%乙醇溶液洗涤瓶内的残渣并将溶液并入容量瓶内，重复洗涤2次，用70%乙醇溶液定容，混匀，取一定体积皂化液于离心管中，5000 r/min离心5 min，取上清液。上清液混匀后准确移取6.0 mL，加2 mL水，于15 mL具塞离心管中涡旋均匀，即得样品待净化液。

SelectCore vADE RC 维生素专用柱 60mg/18mL

活化：依次使用3 mL甲醇、5 mL水活化，弃去流出液；

上样：取步骤3中制备好的样品待净化液全部上样至专用柱上，控制流速小于2 mL/min，弃去流出液；

淋洗：用10%甲醇溶液每次5 mL，洗涤2次15 mL具塞离心管并过柱，再用10 mL 10%甲醇溶液淋洗维生素专用柱，负压抽干维生素专用柱；

洗脱：用乙腈洗脱3次，每次1 mL，合并洗脱液，于40 ℃下用氮气吹干，准确加入1.0 mL乙腈，涡旋均匀，过0.2 μm微孔滤膜至进样瓶中，待测。

1）进行实验时使用的所有器皿不能含有氧化性物质；

2）实验器具分液漏斗、活塞、玻璃等物表面不要涂油；

3）样品前处理过程需避光操作；

4）样品前处理过程应在通风柜中操作；

5）固相萃取淋洗时，建议使用20 mL 10%甲醇溶液淋洗，否则后续乙腈洗脱时可能会出现一些皂化液共洗出。