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反相色谱法 | 替尔泊肽有关物质的分离

替尔泊肽（Tirzepatide）作为GIP/GLP‑1双受体激动剂，凭借独特的双重靶点激活机制，在2型糖尿病、肥胖症治疗领域得到广泛应用。该药物属于长链多肽化合物，合成工艺复杂，生产过程极易产生缺失肽、错结肽、差向肽三类典型杂质：缺失肽会直接导致药效衰减；错结肽存在潜在免疫原性风险；差向肽分子量与主药一致，空间构象改变会直接削弱双受体激动活性，这三类杂质与主药分子结构高度同源、色谱行为十分接近，分离难度极大，是替尔泊肽质量控制的核心重点与难点。

反相色谱法因其适用性广、分离能力强，是多肽药物有关物质分析的首选方法。




替尔泊肽 Tirzepatide

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图1、替尔泊肽的结构式

本文采用ChromCore AQ C18反相色谱柱对上述替尔泊肽中3类相关杂质（错结肽、缺失肽和差向肽）进行分离，详细谱图和色谱条件如下所示：


一、应用案例


替尔泊肽反相分离谱图

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二、实验结论


本文采用纳谱分析ChromCore AQ C18 3μm, 4.6×250mm色谱柱，对替尔泊肽及其中3个相关已知杂质进行了测试，在优化的色谱分离条件下，主峰与前后杂质的分离良好，其中差向肽D-Ser32  (S32外消旋化) 杂质与主成分的分离效果良好 (Δt=1.765 min) ，主成分面积归一化含量为96.86%，为替尔泊肽及相关杂质的分离与纯度分析提供可靠有效的参考方案。

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