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图1.红2G化合物结构式
红2G(Acid Red 1),又称酸性红1、食品红10,化学式C₁₈H₁₃N₃Na₂O₈S₂,是一种偶氮类工业染料,应用于工业染色、化学分析等领域,并非食品添加剂。然而,因其色泽鲜艳,红2G被部分不法商家用于腊肠等食品染色以改善色泽,这种色素被人体摄入后可能会分解出致癌物质苯胺,存在诱发癌症的可能性。
纳谱分析依照食品补充检验方法BJS 202505标准化的检测方法要求,采用SelectCore WAX固相萃取柱和ChromCore AQ C18色谱柱,对样品进行分析测定,获得了良好的结果,为食品基质中红2G的检测提供参考。
一、适用范围
本方法适用于香辛料、固体复合调味料、半固体复合调味料、豆制品、肉制品、水产制品中红2G的测定。
二、实验步骤
1、试剂准备
氨水乙醇溶液:量取氨水20 mL,再加入无水乙醇70 mL用水稀释至100 mL。
氨水甲醇溶液:量取氨水2 mL,用甲醇稀释至100 mL。
5%甲醇水溶液:取甲醇5 mL,用水稀释至100 mL。
10 mmol/L乙酸铵溶液:称取乙酸铵0.7708 g,用水溶解并稀释至1000 mL。
50%乙酸铵乙腈溶液:量取10 mmol/L乙酸铵溶液50 mL,用乙腈稀释至100 mL。
2、试样提取
准确称取试样2 g (精确至0.001 g) 置于50 mL聚丙烯离心管中,加入氨水乙醇溶液10 mL,涡旋混匀1 min,超声10 min,10000 r/min离心10 min,上清液转移至20 mL容量瓶中;残渣再加入5 mL氨水乙醇溶液,重复提取一次,上清液转移至同一容量瓶中,氨水乙醇溶液定容至刻度,混匀,待净化。
精密吸取10 mL提取液至氮吹管中,60 ℃吹至约1 mL,加入10 mL 5%甲醇水溶液溶解残渣,作为待净化液。
3、试样净化 (固相萃取法)
SelectCore WAX固相萃取柱150mg/6mL(P/N: WAX060-060150-1)
活化:依次使用6 mL甲醇、6 mL水进行活化;
上样:待2中制备好的净化液以低于1.0 mL/min的流速通过固相萃取柱;
淋洗:依次用6 mL水、6 mL甲醇淋洗小柱,弃去淋洗液;
洗脱:用10 mL氨水甲醇溶液洗脱,分两次加入,收集洗脱液。40 ℃氮气浓缩至近干,精密加入1 mL 50%乙酸铵乙腈溶液复溶,过微孔滤膜,供液相色谱-串联质谱仪分析。
4、液相色谱条件

5、质谱条件

三、实验谱图及加标回收率数据

图2、腊肠基质红2G标准曲线线性图(R2>0.99)

图3、红2G标准品、腊肠空白样品、腊肠空白样品加标
(加标量25 μg/kg)对比图

四、实验结论
由实验谱图及加标回收率数据可知纳谱分析的SelectCore WAX固相萃取柱针对腊肠这类高脂肪样品的净化效果良好、并且回收率满足检测要求;采用ChromCore AQ C18色谱柱可以获得良好的色谱峰形,确保红2G准确定量。
实验注意事项
1)氨水乙醇溶液和氨水甲醇溶液中的氨水易挥发,溶液配制后不宜长时间放置;若放置过久,应重新配制;
2)实验室常用的尼龙滤膜、聚醚砜滤膜,对红2G存在较强的吸附作用,而亲水PTFE滤膜对红2G的吸附作用最弱,建议使用亲水PTFE针式滤器进行过滤样品溶液;
3)红2G在本方法适用的食品基质中存在较强的基质抑制效应,需采用基质匹配标准溶液法对基质效应进行校正;本实验采用的是空白基质加标净化后的标准系列工作液。
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